Celigo全視野細胞掃描分析儀系統配備高質(zhì)量的明場(chǎng)通道和多這四個(gè)熒光通道,可提供高通量、全孔成像和定量數據分析,用于多種細胞實(shí)驗的檢測。Celigo全視野掃描分析儀常用于研究貼壁和懸浮細胞、3D腫瘤球、iPSC克隆和腫瘤干細胞克隆,Celigo兼容各種微孔板(從6孔到1536孔)和T培養瓶。
軟件以工作流程為基礎,具有直觀(guān)的界面,可同時(shí)成像和分析;提供動(dòng)態(tài)分析,例如多時(shí)間點(diǎn)拍攝生長(cháng)追蹤,細胞群進(jìn)行類(lèi)流式設門(mén)分析和細胞群統計報告??捎貌噬B加圖顯示特定細胞群的細胞圖像。
Celigo可進(jìn)行高速全自動(dòng)化的成像,并可在復雜的樣本類(lèi)型申對多種細胞類(lèi)型進(jìn)行量化分析。同時(shí) 提供了豐富的應用程序選項,包括無(wú)標記細胞計數、基于融合率的細胞生長(cháng)追蹤、殺傷實(shí)驗、細胞凋亡、細胞周期分析、細胞遷移、細胞侵襲實(shí)驗,以及其他細胞實(shí)驗分析(包括受體內吞蛋白表達和檢測、磷酸化和吞噬作用)。
光學(xué)透鏡:全孔成像,每成像一次孔僅位移一次。
明場(chǎng):提高孔邊緣的明場(chǎng)光學(xué)圖像對比度,消除孔邊緣的光學(xué)失真,精確識別孔里的每個(gè)細胞。
圖像圈定:明場(chǎng)和熒光算法,可精確圈定貼壁細胞和懸浮細胞。
對每個(gè)孔中的每個(gè)細胞進(jìn)行計數:獲取高分辨率的全孔圖像(在明場(chǎng)和熒光通道中),并對每個(gè)孔中的每個(gè)細胞進(jìn)行計數。
自動(dòng)保存高分辨率圖像:使用Celigo圖像可對結果進(jìn)行驗證,所有孔的圖像均會(huì )自動(dòng)保存。
腫瘤細胞殺傷動(dòng)態(tài)檢測:在使用Calcein AM進(jìn)行無(wú)損、動(dòng)態(tài)實(shí)驗的過(guò)程中,我們在第0小時(shí)和第6小時(shí)獲取同-96孔板(顯示于下側)的圖像。Celigo圖像證實(shí):在同一孔中,Calcein AM陽(yáng)性活腫瘤細胞的數量從11,381減少到1,635。
NK細胞介導的細胞毒性對靶細胞的影響
對calcein AM陽(yáng)性活細胞進(jìn)行計數,以測定共培養細胞中雙功能融合蛋白(M7824)對NK細胞介導的細胞毒性的影響。
使用TGF-B1和IFN-Y對靶細胞A549進(jìn)行預處理,使用calcein AM(CAM) 進(jìn)行染色。將NK細胞從PBMCS中分離出來(lái),與A549細胞共培養。
在復雜的共培養體系中追蹤雙特異抗體誘導的細胞毒性
Celigo對胎兒細胞(CellTrackerGreen染色)和HER2敲除細胞(CellTracker Violet染色)的共同培養體系進(jìn)行直接計數。該實(shí)驗研究了單價(jià)雙特異lgG(DuetMab)對胎兒細胞和HER2敲除細胞共培養體系的選擇性細胞毒性作用。
l對懸浮細胞和貼壁細胞基于transwell實(shí)驗的趨化作用、細胞侵襲和細胞遷移進(jìn)行成像和定量。
小室(A)內的懸浮細胞穿過(guò)多孔膜,朝著(zhù)孔板下層的化學(xué)誘導物遷移。包被了ECM的小室(C)上的貼壁細胞侵襲并遷移到膜的另一側。Celigo可自動(dòng)對遷移的懸浮細胞和貼壁細胞(B、D)進(jìn)行成像和計數。
劃痕實(shí)驗:成像和定量
在多個(gè)時(shí)間點(diǎn),對整個(gè)孔進(jìn)行成像。成像的同時(shí),軟件會(huì )自動(dòng)計算每個(gè)孔中的細胞融合率。
采用直接細胞計數法,監測生長(cháng)抑制情況
劑量依賴(lài)型生長(cháng)抑制
生成的圖像(顯示于左側)來(lái)自?xún)蓚€(gè)孔:B2和B10;之后分別按照33.3um和0.005um的劑量對兩個(gè)孔進(jìn)行藥物處理。